大鼠孕酮(P)elisa试剂盒显色和比色

孕酮（progesterone，P）是21C类固醇激素，由胆固醇经孕烯醇酮通过异构酶转化而成。在妇女，卵巢中的卵泡膜细胞产生P，期间，P则主要由胎盘合体滋养细胞层分泌，故血中P水平主要与胎盘重量及血液灌注量相关。孕早期上升较慢，13周后增快，足月时达高峰。在血中，P主要与皮质类固醇结合蛋白（CBG）及白蛋白相结合，血液中绝大部分P为结合型，极少数为游离型。孕酮主要在肝脏降解，被还原成孕二醇，孕二醇再与硫酸或葡萄糖醛酸结合后经肾排出。P对调节月经周期和维持妊娠具有重要的生理作用，可促进子宫内膜分泌期的转化，为受精卵着床做准备；松弛子宫肌，降低对前列腺素和催产素的反应性；抑制输卵管节律性收缩。P还有促乳腺腺泡增生，增加能量代谢，升高基础体温，促进水钠排除的作用。P对下丘脑-垂体系统具有正、负反馈作用，可调控垂体促性腺激素的合成和分泌。排卵前小剂量孕酮协同E3诱发排卵前LH高峰出现，排卵后大剂量P对下丘脑-垂体系统则呈现负反馈作用。

显色

　　显色是ELISA试验中最后一步温育反应，此时酶催化无色的底物生成有色的产物。反应的温度和时间仍是影响显色的因素。适当提高温度，有助于加速显色。在一定时间内，阴性孔可保持无色，而阳性孔则随时间的延长而呈色加强。在定量检测中，加入底物后的反应温度和时间应按规定力求准确。ELISA显色结果最好通过酶标仪进行，可减少实验误差，提高临界值样本的分析准确度。尽量避免肉眼直接判断结果，因为不同个体的视觉存在差异。应注意，加显色剂时，要保持显色剂不外流。加终止液时应避免产生较多气泡，否则可能使假阳性结果的出现概率增加。

比色

　　比色的方法有目视法和酶标比色法2种。目视法简单明了，但对同一标本，操作者的不同有时会出现不同的结果，具有一定的主观性。比色的结果通常用光密度表达，现按规定用吸光度表达。酶标仪不应安置在阳光或强光照射下，操作时的适宜室温在15℃~30℃之间，使用前要先预热仪器15~30min，使测得结果更为准确。比色前，应先用洁净的吸水纸擦拭干净板底附着的液体，然后将板正确放在酶标比色仪的比色架上。综上所述，优质的试剂，良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。在实际应用过程中，操作者必须熟练掌握基本操作技能，对每个环节进行严格仔细的核查，尽量避免假阳性和假阴性反应的出现，保证检测结果真实可靠，为临床诊断和疾病防治提供可靠的理论依据。

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