乳酸脱氢酶试剂盒测定原理

测定原理：

LDH催化NAD+氧化乳酸生成丙酮酸，丙酮酸进一步与2, 4 - 二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙，在碱性溶液中显棕红色，颜色深浅与丙酮酸浓度成正比。

试剂的组成和配制：

提取液：60mL×1 瓶， 4℃保存；

试剂一：液体 5 mL×1 瓶， 4℃保存；

试剂二：粉剂×1 支，-20℃保存，用时加入 10μL 试剂五和 1.3 mL 蒸馏水充分溶解备用，用

不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融；

试剂三：液体 5 mL×1 瓶，4℃保存；

试剂四：液体 20 mL×1 瓶，4℃保存；

试剂五：液体 100μL×1 支，4℃保存；

样品测定的准备：

1、细菌、细胞或组织样品的制备：

细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量

（104个）：提取液体积（mL）为 1000~5000：1 的比例（建议 2000 万细菌或细胞加入 1mL

提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30

次）；8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。

组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，

加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。

2、血清（浆）样品：直接检测。

相关文献支持：

文章标题《丙泊酚介导细胞自噬及Nrf2信号通路对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用》

摘要：目的:探讨丙泊酚介导细胞自噬及Nrf2信号通路对大鼠心肌缺血再灌注损伤的?；ぷ饔?。方法:将60只SPF级雄性SD大鼠分为假手术组、模型组和丙泊酚组,每组各20只。采用结扎左冠状动脉前降支法制备MI/RI损伤模型（缺血30 min,再灌注2 h）;丙泊酚组心肌缺血前15 min给予静脉输注丙泊酚6 mg•kg-1•h-1至再灌注2 h,假手术组和模型组静脉输注生理盐水3 mL•kg-1•h-1,再灌注2 h。使用超声心动图观察大鼠心脏功能,ELISA法检测心肌损伤标志物和心肌组织氧化应激因子水平,HE染色观察各组大鼠心肌组织病理变化,Western blot检测心肌组织中自噬和核转录因子E2相关因子2（Nrf2）信号通路相关蛋白水平。结果:LVEF、FS、LVWT、HR和LVSP水平等心功能指标在模型组、假手术组和丙泊酚组的差异均有统计学意义（P<0.05）。模型组CK-Mb、Mb和cTnI水平高于假手术组（P<0.05）,丙泊酚组低于模型组（P<0.05）;